StarLighter Script RT all-in-one Mix

   

 

产品简述

启衡星StarLighter Script RT all-in-one Mix包含第一链cDNA合成除RNA模板及水外的所有组分(StarLighter Script RTase,RNA酶抑制剂,dNTPs,Oligo(dT)20 、随机引物,以及各种缓冲组分),只需加入RNA模板和水便可进行第一链cDNA的快速合成。预混液含除RNA模板和水之外第一链cDNA合成所需的全部组分,操作简便,减少污染。

StarLighter Script RTase为定向改造的反转录酶,具有更优异的性能,可无差别合成更高产量和更长的cDNA,并耐受55℃的高温,并具有更快的反应速度,更宽的模板使用范围,适合应用于一步法的反转录。

 

产品应用

基因表达分析;

基因表达验证(基因改造);

RNA拷贝数检测(病毒及病菌等检测);

转录本克隆。

 

产品优势

反转录结果准确反映模板信息;

对高GC片段有优异的转录结果;

轻松应对降解,低起始量样本;

兼容各种类型样本。

 

反转录结果准确反映模板信息

反转录模板量动态范围宽,起始量从2000ng-0.2ng均可有效进行反转录。模板量与Ct值之间相关性好,在一定浓度范围内,用反转录出来的cDNA进行定量,能较为准确地反映RNA原始模板信息。

(1)

   

上表的反转录RNA量(反转录模板量对应的log值)与qPCR Ct值的线性关系:

   
   

以不同起始量的人Hela细胞系RNA(已去除DNA)为模板进行反转录,取1/10体积反转录产物作为定量模板,并用启衡星StarLighter SYBR Green qPCR Mix进行定量实验(YWHAZ引物,产物249bp,产物GC含量44.6%),比较不同反转录试剂--反转录RNA量与qPCR Ct值间的关系。

(2)

   

上表的反转录RNA量(反转录模板量对应的log值)与qPCR Ct值的线性关系:

   
   

以不同起始量的人Hela细胞系RNA(已去除DNA)为模板进行反转录,取1/10体积反转录产物作为定量模板,并用启衡星StarLighter SYBR Green qPCR Mix进行定量实验(ActB引物,产物153bp,产物GC含量60.1%),比较不同反转录试剂--反转录RNA量与qPCR Ct值间的关系。

对高GC片段有优异的转录效果

本试剂盒包含的反转录酶能耐受55度高温,在该条件下,复杂的高GC区域能更好打开,使得反转录更加充分。

   

上表的反转录RNA量(反转录模板量对应的log值)与qPCR Ct值的线性关系:

   

以不同起始量的人Hela细胞系RNA(已去除DNA)为模板进行反转录,取1/10体积反转录产物作为定量模板,并用启衡星StarLighter SYBR Green qPCR Mix进行定量实验(ApoE引物,产物322bp,产物GC含量75.5%),比较不同反转录试剂--反转录RNA量与qPCR Ct值间的线性关系。

 

轻松应对降解、低起始量样本

本试剂盒包含的反转录试剂能从低模板量、高度降解的RNA样本中有效反转录出cDNA,并在qPCR检测中,模板量与Ct值之间仍保持高度的相关性。

   

采用加热的方法对人Hela细胞系RNA进行降解处理,使用Agilent 2100 Bioanalyzer进行RIN值测定,通过调节加热处理的时间得到RIN值为2、4、6、8的RNA。分别以RIN值为2、4、6、8的RNA各20ng、2ng、0.2ng作为模板进行反转录,取1/10体积反转录产物作为定量模板,并用启衡星StarLighter SYBR Green qPCR Mix进行定量实验(引物YWHAZ,产物长度2490bp,产物GC含量44.6%;引物HMBS,产物长度200bp,产物GC含量62.5%)。

 

兼容多种类型样本

   

Figure 3 不同物种的RNA样本逆转录后经qPCR检测的CT值

以不同物种的RNA 200ng为模板进行反转录,取1/10体积反转录产物作为定量模板,并用启衡星StarLighter SYBR Green qPCR Mix进行定量实验,比较不同反转录试剂的Ct值。

 

说明书下载

StarLighter Script RT all-in-one 说明书V1.pdf                         

 

StarLighter Script RT all-in-one Mix

启衡星StarLighter Script RT all-in-one Mix包含第一链cDNA合成除RNA模板及水外的所有组分(StarLighter Script RTase,RNA酶抑制剂,dNTPs,Oligo(dT)20 、随机引物,以及各种缓冲组分),只需加入RNA模板和水便可进行第一链cDNA的快速合成。预混液含除RNA模板和水之外第一链cDNA合成所需的全部组分,操作简便,减少污染。 StarLighter Script RTase为定向改造的反转录酶,具有更优异的性能,可无差别合成更高产量和更长的cDNA,并耐受55℃的高温,并具有更快的反应速度,更宽的模板使用范围,适合应用于一步法的反转录。


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