StarLighter SYBR Green qPCR Mix (Universal)
StarLighter 染料法 qPCR 预混液(通用型)
产品简介
StarLighter SYBR Green qPCR Mix 是一款含基因工程酶的 qPCR 试剂。 该基因工程酶耐受高浓度的 SYBR Green I 染料,反应体系中加入足够多的 SYBR Green I 染料, 能够降低荧光信号达到阈值所需的循环数 (Ct值),提高信噪比、线性和灵敏度。StarLighter SYBR Green qPCR Mix 扩增特异性强, 能有效减少非特异性扩增, 数据结果更加可靠。 产品能有效扩增复杂模板, 能有效应对高 GC 或高 AT 的目的片段。 同时抗抑制剂干扰能力强。
产品优势
1. 扩增特异性强,数据结果可靠;
2. 扩增效率高,Ct 值提前;
3. 信噪比高,灵敏度高;
4. 高 GC 或高 AT 的片段扩增效果好;
5. 耐受抑制剂能力强。
产品应用
1. 基因表达分析;
2. 低拷贝数基因检测;
3. 基因敲除验证;
4. 基因表达验证;
5. RNA 拷贝数检测(病毒及病菌等检测)。
产品性能
1、扩增特异性强,性能表现优异
与众多国内外品牌 qPCR Mix 相比,启衡星 SYBR Green qPCR Mix 表现出超好的性能。


Fig.1 不同试剂的 qPCR 结果准确性比较。以人的 cDNA 为模板,使用同厂家试剂,扩增长度为 219 bp 的片段,GC%=64% (TR 基因 )。分别得到 StarLighter SYBR Green qPCR Mix 与各品牌的扩增和熔解曲线图;SL—StarLighter SYBR Green qPCR Mix,得到非常完美的扩增曲线,荧光信号强,溶解曲线及电泳条带单一 、准确。
2、扩增效率高,线性范围好,低拷贝检测灵敏度高

Fig.2 不同试剂对连续梯度稀释模板的定量结果比较。 以 KAPA Ion Torrent Library Quantification Kit 中浓度为 8.3 pM 的标准品作为 S1,依次 5 倍稀释得到 (S2-S10) 为模板,分别用 StarLighter SYBR Green qPCR Mix 与供应商 KP 进行 qPCR 定量获得的扩增曲线及熔解曲线图。StarLighter SYBR Green qPCR Mix,从 S1-S10 扩增效率 (Eff =100.48%)好,扩增曲线完美, 荧光信号强,溶解曲线单一。
3、荧光信号强,灵敏度高

Fig.3 不同试剂扩增曲线的荧光强度比较。 使用同样模板和引物,使用市面上各品牌的 qPCR 试剂得到扩增曲线图,右图为去掉 Rox 后的各品牌的荧光信号值比较,供应商 K 与 StarLighter SYBR Green qPCR Mix 荧光信号强度最高。
4、Ct 值出现更早

Fig.4 不同试剂 qPCR 结果的 Ct 值比较。以人 DNA 为模板,使用不同厂家试剂,扩增长度为 219 bp 的片段,GC%=64% (TR基因); 在产物经电泳验证为目的片段的前提下,扩增曲线去掉 Rox 校正后,StarLighter SYBR Green qPCR Mix Ct 值最小,灵敏度最高。
5、高 GC 或高 AT 的片段扩增效果好

Fig.5 不同试剂定量高 AT 片段的结果比较。以人的 DNA 为模板,使用不同厂家试剂,扩增长度为 198 bp 的片段,AT%=64.4% (hPRTl 基因); 从扩增效率上看,StarLighter SYBR Green qPCR Mix,Eff=l00.87% 为最优;供应商 TY3, Eff=94.63%;供应商 K,Eff=98.33%。
Fig.6 不同试剂定量高 GC 片段的结果比较。以人的 DNA 为模板,使用不同厂家试剂,扩增长度为 322 bp 的片段,GC%=75.5% (ApoE 基因);从扩增效率上看,StarLighter SYBR Green qPCR Mix,Eff=101.31% 为最优;供应商 TY3, Eff=150.10%;供应商 A,Eff = NA (最高浓度无扩增)。
6、耐受抑制剂能力强

Fig.7 不同试剂定量含抑制剂模板的结果比较。以人的 DNA 为模板,使用不同厂家试剂,扩增长度为 393 bp 的片段,GC%=35.6% (F8-exon 10 基因);以天根磁珠法血液基因组提取试剂盒提取的 DNA 为模板,原始模板浓度为 100 ng/µL,作为 S1,之后依次使用同样稀释液按梯度稀释 10 倍分别得到 S2、S3、S4。从扩增效率看,StarLighter SYBR Green qPCR Mix,Eff=94.37% 为最优;供应商 K,Eff=NA( 最 高 浓 度 无 扩 增)。StarLighter SYBR Green qPCR Mix 扩增效率符合要求,供应商 K 的S1 模板未扩增。
7、 试剂稳定易保存
4℃ 保存稳定性
常温与 37°C 保存稳定性
反复冻融
Fig.8 StarLighter SYBR Green qPCR Mix 稳定性测试的结果展示。以人的 DNA 为模板,扩增长度为 123 bp 的片段 (UBC 基因),GC%=52%,未见明显信号强度降低和 Ct 值延迟。
图 A :试剂 4℃ 保存至 39 天;
图 B :试剂室温保存至 8 天;
图 C :试剂 37℃保存至 8 天;
图 D :试剂反复冻融至 35 次;