StarLighter DNase I

StarLighter DNase I
StarLighter DNA I
产品简介
启衡星 DNase I (Deoxyribonuclease I) 是一种可酶切单链和双链 DNA 的核酸内切酶,无 RNase 活性。它可以水解磷酸二酯键,产生带有 5’-磷酸基团和 3’-羟基基团的单脱氧核糖核苷酸和寡脱氧核糖核苷酸。该酶的活性严格依赖于钙离子,由镁离子或锰离子活化。镁离子存在条件下,DNase I 可在双链 DNA 的单链上随机位点进行剪切;锰离子存在条件下,DNase I 可在同一位点剪切 DNA 双链,形成平末端,或 1-2个核苷酸突出的粘末端。
 
产品优势
1. 重组酶;
2. 无内源性RNase,来源于非动物宿主;
3. 10 mM EDTA 65°C 处理10 min 即可完全失活。
 
产品应用
1. 制备不含 DNA RNA 样品;
2. RT-PCR RT-qPCR 之前制备无DNA 污染的 RNA
3. 采用 DNase I 足迹法进行 DNA-蛋白相互作用研究。
 
产品性能
1、 消化能力强
用启衡星 DNase I 与其他品牌的 DNase I 消化相同量的 dsDNA 样本和 ssDNA 样本,消化后电泳如图所示,启衡星的 DNase I 消化能力与进口产品相当。
 
2、无 RNase 污染

Tab.1 StarLight DNase I RNase 污染检测分析。供应商 3:某进口品牌一步法 gDNA 去除试剂。
100 ng RNA 100 ng RNA+500 ng gDNA 作为反应模板,在 10 μL 反应体系中加入 0.5 U DNase I37℃消化 10 min, 失活处理。用 cDNA 引物 TBP 进行 RT- qPCR 检测,经 DNase I 处理的 RNA 与未经 DNase Ι 处理 RNA RT-qPCR 单加 RNA 阳性对照 Ct 值一致,说明 DNase I 中无 RNase I 污染。
 
3、失活处理简单
Fig.3 StarLight DNase I 失活电泳图
使用 10 mM EDTA 处理 DNase I65℃ 孵育 15 min,使其失活,再加入 pet 28a 质粒 37℃ 孵育 30 min,琼脂糖凝胶电泳显示未见有明显变化。
 
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